片狀載體的材質對干細胞貼壁效率和狂犬病毒疫苗產量有什么影響?
片狀載體在干細胞培養和狂犬病毒疫苗生產中都有著重要的作用。其材質可能會對干細胞貼壁效率和狂犬病毒疫苗產量產生多方面的影響。
一、對干細胞貼壁效率的影響
表面特性影響細胞附著:
不同材質的片狀載體具有不同的表面化學性質和粗糙度。例如,一些材質可能具有特定的官能團,能夠與干細胞表面的蛋白質相互作用,促進細胞附著。表面較為粗糙的片狀載體可能提供更多的物理結合位點,有利于干細胞的貼壁。
以人臍血單個核細胞的培養為例,在分離人臍血單個核細胞的過程中,不同的分離方法會影響貼壁細胞的數量,進而可能影響干細胞的貼壁效率。其中,一些方法可能會利用特定材質的片狀載體來提高分離效果和干細胞的貼壁效率。
生物相容性影響細胞生存狀態:
片狀載體的材質需要具有良好的生物相容性,以支持干細胞的生存和生長。如果材質生物相容性差,可能會引起細胞毒性反應,導致干細胞死亡或無法正常貼壁。
例如,在兔骨髓間充質干細胞的培養中,采用密度梯度離心法、貼壁篩選法并結合傳代對抽取的骨髓液進行純化,培養過程中使用的一次性塑料培養瓶等載體材質應具有良好的生物相容性,以保證干細胞的正常生長和貼壁。
二、對狂犬病毒疫苗產量的影響
細胞生長支持作用:
合適的片狀載體材質可以為細胞提供良好的生長環境,促進細胞的增殖和狂犬病毒的感染。例如,在狂犬病毒疫苗的生產中,采用 disks 作為片狀載體,在多寧BioCore QC臺式細胞生物反應器中培養Vero細胞,能夠提高細胞密度和狂犬病毒的產量。
在 Vero 細胞培養制備狂犬病毒疫苗的過程中,應用 15L 生物反應器和片狀載體對 Vero 細胞進行高密度培養,能制備高毒力滴度的狂犬病毒收獲液,經純化后生產人用凍干狂犬病疫苗。這表明片狀載體在支持細胞生長和提高疫苗產量方面具有重要作用。
病毒感染和復制的影響:
片狀載體的材質可能會影響狂犬病毒對細胞的感染效率和病毒在細胞內的復制過程。一些材質可能有利于病毒的吸附和進入細胞,從而提高病毒的感染率和復制速度,進而增加疫苗產量。
例如,在 BHK-21 細胞培養生產獸醫狂犬病疫苗的研究中,研究了微載體濃度、生長培養基類型、培養模式和血清濃度等因素對細胞生長和病毒產量的影響。雖然沒有直接涉及片狀載體材質的研究,但可以推測不同的載體材質可能會對這些因素產生影響,從而間接影響疫苗產量。
在細胞培養技術的實際應用中,片狀載體作為優化貼壁細胞培養效率的關鍵組件,正成為生物制造領域的重要選擇。以蘇州阿爾法生物提供的DISKS 片狀載體為例,其采用聚酯纖維基質,通過熱焊接技術形成單層厚度 0.44 毫米、孔徑 15 微米的三維立體結構,可在填充床生物反應器、一次性生物反應器等設備中為細胞提供高達 1500 平方厘米 / 克的比表面積。這種設計不僅提升了細胞貼附密度(如 293T 細胞培養密度可達 5×10?/ml),還通過潮汐式培養基流動優化了營養交換與代謝廢物排出,降低了傳統攪拌式反應器的機械損傷風險。