光學顯微鏡適用于多種檢材,如組織切片、活細胞、電路板等。不同檢材光學特性差異大,需使用不同觀察方式,主要有明場、相差、熒光、偏光、DIC、暗場、霍夫曼相襯七種方式。
一臺光學顯微鏡可能擁有一種或多種觀察方式,今天我們先來說說明場觀察方式。
(1)成像原理
明場觀察是光學顯微鏡最基礎的觀察方式,其利用可見光(約400-700nm)作為照明光源,光線相位、照射角度等性質不作改變,直接照射在樣品上進行成像。
明場觀察有透射照明和反射照明兩種照明方式,前者是照明光線透過樣品后進入物鏡,主要適合有透明度的薄樣品;后者是照明光線照射到樣品后反射進入物鏡,主要適合不透明的厚樣品。
使用技巧:關鹵素燈光源前先把光強調低。以高光強啟動鹵素燈容易導致燈泡燒壞,調低光強再關,可以避免下次開燈時意外燒壞燈泡。LED光源則基本不影響,但養成好習慣總是有益的。
目前專業LED光源已逐步成為主流,其色溫恒定在5000K左右,接近日光的平均色溫,顯色性較好,人眼觀察和數字相機成像都有較好效果。此外LED光源功耗低亮度高,一般3W LED可以達到30W鹵素燈光強,方便即開即用,壽命長,免維護,因此明美大部分顯微鏡均默認采用LED作為明場光源,鹵素燈則作為可選。
聚光鏡會有倍數刻度或者數值孔徑刻度,一般調到物鏡對應的倍數,或者比物鏡數值孔徑稍低的數值即可。更精準的調試方式,拔出目鏡,邊調節孔徑光闌邊從觀察筒觀察物鏡后焦平面,當畫面占視野3/4左右時效果好,但不建議頻繁這樣操作,因為容易讓觀察筒進灰。
產品小知識1:除了數值孔徑,聚光鏡還有消色差、消球差等規格區別,在40X以上會對成像質量有較大影響,所以并不是數值孔徑高就等于更好。
產品小知識2:如果您想使用超低倍2X物鏡,您需要選配搖出式聚光鏡。
明場觀察能較好地呈現樣品色彩,但襯度較低,尤其是透射照明的明場中。在透射照明成像過程中,帶有樣品信息的光線與背景光線混合在一起,這使樣品淺色部分與背景對比度較低,遇到活細胞等透明樣品基本看不出細節。因此,該觀察方式適合已經染色樣品或本身有顏色的樣品進行成像。
明美研究級生物顯微鏡ML51-N明場觀察樣品圖
左圖:HE 組織病理切片樣品 右圖:IHC 免疫組化樣品
②材料分析:金相組織 、電路芯片等。
明美金相顯微鏡MJ43
推薦產品:ML11/ML31/ML41/ML51
推薦產品:MJ31/MJ33/MJ43/MJ41-LED/MJ42
推薦產品:MZ62/MZ101
可適用于常規生物醫學檢驗,科研研究和工業檢測等高精度觀察領域
④顯微鏡相機
推薦產品:MSX11/ MSX2 /MSX1/MDX